在日常生活中,真菌感染是比較常見的現(xiàn)象,其中又以念珠菌?。ㄓ址Q假絲酵母菌病)最為常見。念珠菌的種類很多,但真正能對人致病的卻不多,其中白色念珠菌是一種致病力強(qiáng),可以造成人體體表或深部感染的真核微生物。
白色念珠菌是寄生在人體皮膚、口腔、胃腸道、陰道等黏膜上的正常菌群。當(dāng)人體免疫功能出現(xiàn)異常或正常菌群失調(diào)時,白色念珠菌可引起全身系統(tǒng)性感染、粘膜皮膚感染、下呼吸道感染以及泌尿系統(tǒng)感染等疾病[1]。研究表明,在亞洲引起深部真菌病的病死率高達(dá)30% 左右[2]。
在我國,2020年版《中華人民共和國藥典》將白色念珠菌作為微生物檢驗真菌的代表菌。一旦藥品中檢出白色念珠菌即可確認(rèn)該藥品被真菌污染。
那么,如何檢測產(chǎn)品被真菌感染?下面同小編一起來《中華人民共和國藥典》中尋找答案吧。
首先,在做正式試驗前,應(yīng)進(jìn)行方法適用性試驗,以確認(rèn)所采用的方法適合于該產(chǎn)品的控制菌檢查。
具體操作如下:
1.進(jìn)行菌液制備。將白色念珠菌接種于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上或沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中,在20-25℃條件下,培養(yǎng) 2-3天,再將上述培養(yǎng)物用pH 7.0的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的菌懸液;
2.按控制菌檢查法取規(guī)定量供試液及不大于lOOcfu的試驗菌接入規(guī)定的培養(yǎng)基中;
3.在規(guī)定的溫度和最短時間下培養(yǎng),應(yīng)能檢出白色念珠菌試驗菌相應(yīng)的反應(yīng)特征。
為確認(rèn)試驗條件是否符合要求,應(yīng)進(jìn)行陰性對照試驗。陰性對照試驗應(yīng)無菌生長,如陰性對照有菌生長,應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。方法適用性試驗結(jié)果判斷見圖1。
其次,按經(jīng)方法適用性試驗確認(rèn)的方法進(jìn)行供試品的控制菌檢查。
說明:白色念珠菌在沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的菌落呈乳白色,偶見淡黃色,表面光滑并伴有濃酵母氣味。隨著培養(yǎng)時間的增加菌落增大,顏色變深、質(zhì)地變硬或有皺褶(見圖3);白色念珠菌在顯色培養(yǎng)基平板上呈現(xiàn)藍(lán)綠色。
最終結(jié)果判斷:若沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上有疑似菌落生長,且疑似菌在念珠菌顯色培養(yǎng)基平板上生長的菌落呈陽性反應(yīng)(呈藍(lán)綠色),則應(yīng)進(jìn)行適宜的鑒定試驗,確證是否為白色念珠菌;
若沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上無菌落生長,或雖有菌落生長但鑒定結(jié)果為陰性,或疑似菌在念珠菌顯色培養(yǎng)基平板上生長的菌落呈陰性反應(yīng),則判斷供試品未檢出白色念珠菌。
近幾年,關(guān)于白色念珠菌引起的感染報道日益增加,掌握正確的檢測方法,嚴(yán)格控制易污染源頭,提高人體免疫力,對預(yù)防白色念珠菌感染具有重要意義。
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